有心栽花花满园,安评所攻陷MCAO模型
缺血性脑卒中是最常见的脑血管病类型,是由于脑部血液循环障碍,缺氧、缺血导致的局部脑组织软化坏死,因脑卒中的高致死率和致残率,脑卒中的生理机制及细胞、分子生物学的相关研究成为了近年的研究热点。
线栓法大鼠脑中动脉阻断实验是构建缺血性脑卒中模型最经典的方法,无需开颅,梗死体积大,行为表现和病理状态与临床表现相似。该模型在大鼠颈部正中偏右2~3 mm处纵形切口,钝性分离颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)、颈内动脉(ICA),剥离迷走神经,在CCA近心端和远心端及ECA近分叉处挂上手术线备用,结扎近心端CCA、ECA。在CCA距离“Y”型分叉2~3 mm处用5mL注射器针头扎一楔形切口,将栓线从CCA上切口插入,沿着ICA入颅方向插入线栓,有轻微阻力时停止,之后结扎CCA远心端固定栓线,缝合切口,造模24 h后进行Zealonga评分,判断造模情况。
然而,该方法的成功建立关卡重重。颈动脉位于颈前肌群较深处,难以找到;剥离血管困难,颈内颈外分叉下迷走神经难以分离,易受到损伤,从而影响大鼠呼吸导致死亡;血管细且脆弱,稍一牵拉过猛就会导致血管断裂;大鼠血管的形态、走向个体差异大,插线栓有时容易,有时却很困难,插栓的角度和手法非一日之功;术中创面较大,出血较多,造模后大鼠死亡率极高......
安评所评价一部的工作人员通过查阅大量国内外文献、学习教学视频、并与专业人士讨论手术方案,在开展了多次预试验、练习了两百多只大鼠、经历了“术中大出血”、“线栓插不进去”、“术后存活率低”等重重困难后,一步步在失败中积累经验,历时两个多月,终于摸索出了一套细致的优化方案,起初1小时才能造模成功一只鼠,到后来平均15分钟即可完成,成功构建了SD大鼠的线栓法缺血性脑卒中模型,该模型均一性高且动物死亡率低,可更好地应用于相关疾病的机制研究,以及相关药物的药效研究。
安评所在此之前已成功建立了大小鼠脾虚模型、大鼠和小鼠衰老模型、家兔关节退变损伤动物模型、肝胃不和模型、大鼠急性和慢性肝炎模型、移植瘤小鼠模型等三十余种药效学模型,并具有完成十多项毒理学评价、药代毒代动力学评价的能力。目前,缺血性脑卒中模型市场售价大概在800-1200元/只,该模型的成功建立又为安评所的技术服务能力添砖加瓦。